L’administration d’un transgène par les vecteurs rAAV chez les primates non humains dans le muscle squelettique s’avère possible. Telle est la communication faite par P. Moullier ( CHU-EFS-Inserm, UMR U649 Nantes) lors du congrès de Myologie de Nantes.

Des publications ont déjà rapporté à ce jour la bonne tolérance des transgènes hétérogènes contenant le gène de la dystrophine humaine dans les modèles murins mais c’est la première fois que ce type d’expérimentation (avec un rAAV et un gène rapporteur) est réalisé chez le singe. La durée et les niveaux de transduction sont remarquables. Une seule administration percutanée chez le singe permet une expression du transgène au-delà de 6 ans sans signe de toxicité. Cependant, le vecteur ne diffuse que très peu. La perfusion isolée du membre est une alternative à l’administration percutanée. Les résultats préliminaires d’études chez le macaque suggèrent la faisabilité de cette approche.

A noter enfin que les réactions immunologiques chez la souris ne sont pas complètement superposables chez les primates, ceci revêtant une importance majeure pour le développement des futurs essais cliniques chez l’homme.

La dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) est une maladie neuromusculaire due à des mutations dans le gène de la dystrophine. Dans environ 75% des cas, la mutation entraîne un décalage du cadre de lecture aboutissant à la synthèse d’une protéine non fonctionnelle. Le saut d’exon (exon-skipping) a pour objectif de supprimer la partie du gène comprenant la mutation afin de rétablir le cadre de lecture et de permettre à la cellule de fabriquer la protéine manquante (la dystrophine). Récemment, Luis Garcia et son équipe (Généthon à Evry) ont réussi grâce à cette technique du saut d’exon (mono-exon) à rétablir la production d’une dystrophine tronquée mais fonctionnelle chez la souris. Pour ce faire, les chercheurs ont utilisé un vecteur AAV (adeno associated Virus) qui a permis d’introduire dans la cellule le gène U7 produisant un petit ARN (du noyau cellulaire). Celui-ci va masquer l’exon défectueux et ainsi rétablir le cadre de lecture dans la cellule. Après injection intra-musculaire ou perfusion intra-artérielle de ce couple AAV-U7 chez la souris mdx, l’expression de la dystrophine a été restaurée dans les plupart des fibres musculaires et les capacités motrices des animaux traités étaient équivalentes à celles des animaux sains.

La suite de ces travaux a été présentée au cours du congrès Myologie 2005 par Luis Garcia. Un an après, le niveau d’expression de la dystrophine est toujours stable dans les muscles de souris traitées par le saut d’exon (AAV-U7). De plus, les chercheurs ont commencé à appliquer cette même technique du saut d’exon chez le chien GRMD (modèle de la DMD). Il est à noter que chez ce modèle animal, il est nécessaire de « sauter » plusieurs exons (saut multi-exons) pour rétablir le cadre de lecture. Le saut multi-exons ainsi testé in vivo, ouvre de nouvelles perspectives thérapeutiques chez les patient DMD pour lesquels le saut mono-exon est insuffisant. Par ailleurs, les chercheurs ont développé de nouveaux vecteurs (AAV et lentivirus) destinés à être utilisés chez l’homme. Ces résultats majeurs permettent d’envisager à présent l’application du saut d’exon thérapeutique chez l’homme.

 Les cellules adipeuses, thérapie de demain ?
 
Longtemps considéré comme un simple organe disgracieux de stockage des lipides, le tissu adipeux se révèle, depuis peu, être un véritable réservoir de cellules souches, capables de donner naissance à des cellules cardiaques, vasculaires, osseuses,voire musculaires... En injectant des cellules souches de tissu adipeux humain, des équipes de chercheurs du CNRS et de l'Inserm ont réussi à régénérer des cellules musculaires humaines, sans réaction de rejet. Ces travaux prometteurs chez la souris ont été présentés jeudi 11 mai au congrès Myologie 2005. Ils représentent un réel espoir dans le traitement de pathologies musculaires, notamment les myopathies de Duchenne, une maladie héréditaire grave se traduisant par une atrophie progressive de tous les muscles.
En 2004, l'équipe CNRS-Inserm de Louis Casteilla avait démontré qu'il était possible d'obtenir, in vitro, des cellules cardiaques à partir de cellules adipeuses. Parallèlement, les équipes Inserm de Bernard Lévy en collaboration avec l'équipe de Louis Casteilla et l'équipe de Anne Bouloumié montraient que ces mêmes cellules pouvaient chez la souris se transformer en cellules constituant les vaisseaux sanguins.
En 2005, les équipes de Christian Dani, chercheur Inserm et directeur du laboratoire «Cellules Souches et différenciation» et Gérard Ailhaud, UMR 6543 CNRS (Institut de signalisation, biologie du développement et cancer) ont réussi à obtenir, à partir de tissu adipeux de jeunes donneurs, des cellules souches multipotentes dénommées hMADS («Human Multipotent Adipose Derived Stem Cell»). Les résultats ont montré qu’une cellule souche hMADS est capable de donner naissance in vitro à une cellule musculaire, osseuse, adipeuse ou de cartilage, en fonction de son environnement.
Transplantées en faible quantité chez la souris mdx (modèle animal de la dystrophie musculaire de Duchenne), ces cellules souches du tissu adipeux n'ont pas été rejetées en l'absence de traitement immunosuppresseur et ont conduit à une expression importante et à long terme de dystrophine humaine. Selon le Pr Gérard Ailhaud, « ces résultats prometteurs ouvrent des perspectives d'allotransplantation de telles cellules chez des patients atteints de maladies musculaires. » Ces travaux ont donné lieu au dépôt d'un brevet international.